首页 > 问答大全 > 重组成功的质粒怎么保存

重组成功的质粒怎么保存

2020-05-24 未知

重组质粒已成功转入大肠杆菌,-20°冻存,怎样活,扩大培养?

首先要进行菌种活化,

可以先从保存的菌种液中吸5ul,接种到加入了相应抗生素的5ml LB培养基中,200转每分钟,37摄氏过夜。

然后根据需要,如果要扩大培养,就按1:100的比例接种到大瓶的LB培养基(加抗生素)中

,37°C 200转每分钟。然后你需要诱导啊什么的就等它的OD600到0.8-1.0左右进行就可。一般这个时间在4-6小时左右。

如果是为了抽提质粒,小抽5ml就可以,

高拷贝质粒一般可以抽到10-40ug。大抽的话就用扩大培养的菌液进行抽提就好。

如果说菌种有老化的现象,活力不高,那么就在5ml培养结束后取100ul涂平板,12h后挑生长旺盛的单克隆再进入5ml LB 培养基中培养。

希望能够帮到你~有题一起讨论解决哦~画线或者直接摇菌。。。。解冻。划板后摇瓶扩大培养重组成功的质粒怎么保存,重组质粒是如何导入受体细胞的?各种方法。

一般大肠杆菌用CaCl2转染法。

动物或植物可以采用脂质载体,基因枪,电击,显微注射,花粉管通,病毒转染等方法

代景亚博客
站长微信/QQ:1332853349
全网vip赚钱项目:www.ziyuxz.cn